خطوات عمل مزرعة البول

مزرعة البول

يهدف اجراء هذا الاختبار الى معرفة المضادات الحيوية القاتلة للبكتريا وغير القاتلة لها اي المضادات التي تظهر لها البكتريا حساسية

Sensitive والمقاومة Resistant
يجب ان تجرى التجربة على البكتريا بعد عزلها ولايجوز استخدامها في الطبق الواحد لاكثر من نوع من البكتريا , ويجب عدم اجرائها واجراء العزل والزراعه اثناء تعاطي المضادات الحيوية .
الطريقة:-


نقوم بفرد او نشر البكتريا المعزولة (المسبب للمرض) على سطح وسط زراعي مناسب وغالبا يكون Sensitivity Agar او غيره حسب نوع البكتريا المراد فحصها , وتتم عملية النشر بواسطة Cotton Swab لكي يغطي كل جزء من سطح الوسط بالنمو البكتيري , ثم توضع اقراص المضادات الحيوية وتوزع بشكل مناسب بحيث يكون كل قرص بعيدا عن الذي بجواره قليلا حيث يكون هناك متسع لتكوين حلقة من عدم النمو على كل قرص .
نغطي الطبق ونضعه في الحاضنه تحت 37 م ولمدة 24 ساعه وثم نقرا النتيجة
النتيجة :
-1 اذا تكونت حلقة فارغة من النمو بكتريا حساسة لذلك المضاد .
- 2 اذا حصل نمو حول قرص المضاد الحيوي بكتريا مقاومة للمضاد الحيوي .

الاحتياطات اللازمة قبل اجراء التحليل:

1-- يجب ان يمتنع المريض عن اخذ اي مضاد حيوي لمدة 48 ساعة

2-- يجب اعطاء المريض عبوة معقمة حتى يجمع بها البول, ويفضل اول بول صباحا

3- يغسل المريض يدية بالماء والصابون وايضا منطقة الحوض ثم ينشفها

4- يترك اول قطرات من البول ويقوم بتجميع البول حتى نصف العبوة

5- يحضر العينة للمعمل في اقل من 15 دقيقة

خطوات عمل التحليل:

1- - يتم ازابة ال Nutrent Agar في حمام مائي .

-2- صب الميديا في الطبق تحت ظروف معقمة (بجوار لهب) .

-3- اغمر سواب معقمة في عينة البول ثم امسح طبق الاجار بها .

4-- حضن لمدة 24 ساعة في الحضانة عند 36 درجة مئوية

-5- لو نمت البكتريا ... اذا ستكمل الاختبار بعمل اختبار الحساسية وتحديد نوع البكتريا .
واذا لم تنمو ستكون نتيجة المزرعة سلبية

-6- تأخذ مسحة من البكتريا وتذوبها في انبوبة بها ماء معقم ... وترج حتى تذوب وتعكر الماء وهذا يسمى بال (spore suspension ).

-7- تحضر طبق اجار كالسابق
-8-تصب ال spoe suspension في الطبق بشكل متجانس حتى يملئ كل الطبق بشكل متساوي .

-9- تنتظر حتى يجف قليلا
10- تقوم بغرس 14-18 ديسك من المضادات الحيوية بواسطة الماسك الخاص بهم .

-11- تحضن لمدة 24 ساعة اخرى ثم تسجل اكبر inhibition zone وتقسم المضادات الحيوية الي ثلاث مجموعات :-
Sensitive (a)
Less Sensitive (b)
Resitant (c)

12- قبل ذلك تأخذ مسحة من عينة البكتريا بالطبق الاول

اهم شيء في صبغة الجرام هو تحديد
Gram -Ve or +Ve 1-
2- شكل البكتريا اما

. Cocci or Bacilli